Monia Verda
Cristallizzazione di lisozima in gel di silice = Crystallization of lysozyme in silica gel.
Rel. Roberto Pisano, Fiora Artusio. Politecnico di Torino, Corso di laurea magistrale in Ingegneria Chimica E Dei Processi Sostenibili, 2022
Abstract
La cristallizzazione di proteine e’ una tecnica utile sia in ambito industriale che di ricerca, nella quale e’ impiegata nello studio della morfologia e funzione biologica di queste macromolecole. Negli anni ha assunto una grande importanza la tecnica di cristallizzazione in matrice gel, che ha il vantaggio di impedire i moti convettivi delle molecole per cui il loro trasporto da bulk a cristallo e’ unicamente di tipo diffusivo. Nel presente lavoro di Tesi sperimentale si è utilizzata la tecnica in gel di silice ottenuto da tetrametossisilano (TMOS), applicandola al lisozima da albume d’uovo di gallina (Hen Egg White Lysozyme, HEWL). Il TMOS ha il significativo vantaggio di non richiedere un riscaldamento per la transizione sol-gel, ma presenta alcuni forti svantaggi: produzione di metanolo come sottoprodotto, che favorisce la solubilità delle proteine, e inibizione della cristallizzazione per la forte affinita’ tra la matrice gel e la proteina.
Per arginare quest’ultimo fenomeno e’ stato studiato l’effetto di alcuni additivi capaci di legarsi ai gruppi -OH liberi sulla superficie del gel, responsabile dei legami idrogeno con le macromolecole proteiche
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