Sintesi di nanoparticelle di chitosano per veicolare RNA = Synthesis of chitosan nanoparticles to deliver RNA

Le nanoparticelle sono sistemi di trasporto che permettono di regolare l’assorbimento, la distribuzione e il targeting di principi attivi nei confronti di una cellula bersaglio. I nanocarriers possono essere sintetizzati a partire da sostanze di natura differente organiche e inorganiche. In questo lavoro di tesi è stata posta particolare attenzione nella sintesi di nanoparticelle polimeriche di chitosano veicolanti RNA sintetizzate utilizzando la tecnica di nanoprecipitazione. Per prevedere il comportamento delle nanoparticelle è necessario analizzare le loro caratteristiche morfologiche come la dimensione media e il potenziale zeta. Tale analisi sono state condotte tramite l’utilizzo dello strumento Zetasizer Nano ZS90. In particolare, lo studio della distribuzione di dimensione di una popolazione di nanoparticelle si basa sull’utilizzo della tecnica di Dynamic Light Scattering (DLS) mentre la misura della stabilità delle nanoparticelle è restituita dal potenziale zeta calcolato tramite la tecnica di Laser Doppler Micro-electrophoresis. La prima fase dell’attività sperimentale è stata dedicata alla preparazione del terreno di coltura, necessaria alla crescita del lievito Saccharomyces Cerevisiae, e alla successiva estrazione di RNA da quest’ultimo. Successivamente sono state sintetizzate le nanoparticelle di chitosano veicolanti RNA di cui è stata misurata l’efficacia di incapsulamento. Un aspetto di fondamentale importanza che è stato investigato è il tempo di rilascio del principio attivo dalle nanoparticelle. Per condurre tale studio, le nanoparticelle sono state introdotte all’interno di soluzioni differenti e sono stati analizzati gli effetti che le varie soluzioni hanno nel processo di rilascio.